灵芝菌种分离：分离物的提纯法介绍

灵芝菌种的纯化与提纯方法

为了获得单一且高纯度的灵芝菌种，必须通过生物学手段将灵芝从复杂的微生物群中进行分离和培养。

灵芝菌种的提纯方法

在灵芝的分离和培养过程中常常会带入杂菌，因此需要对分离物进行提纯。通常可以通过药物或生物技术手段来排除这些污染物。

灵芝菌丝的提纯过程

在获得菌丝后，转接到斜面或平板上，有时会出现菌落边缘不整齐和色泽不一致等情况，这是菌种不纯的表现。为此，必须进行提纯。具体方法是，从斜面或平板上选择具有灵芝特征且生长稳定的菌落，用消毒过的接种刀取其先端菌丝，并转移到新的斜面或平板上，如此重复多次，以获得纯净的菌丝。

排除细菌污染的方法

在灵芝培养中，细菌污染是常见问题，通过以下几个步骤可以有效排除。

1. 覆盖除菌法

首先需将PDA培养基加棉塞，进行灭菌处理。在无菌条件下冷却到约50℃，然后每升培养基中加入40毫克的链霉素或金霉素。取少量被污染的灵芝菌丝移接到处理过的PDA培养基上，在23~25℃的遮光条件下培养，待菌丝生长蔓延后，再用加热溶解的培养基覆盖，以此隔绝细菌，随后挑取先端菌丝转管培养即可。

2. 木屑滤菌法

将试管一端截去，内装少量木屑培养基并加棉塞，经过灭菌和冷却，接入被细菌污染的小块灵芝菌种。然后在23~25℃下遮光培养，这样灵芝菌丝会向木屑深处延伸，而细菌由于无法分解木屑而被阻遏。可从另一端挑取灵芝菌丝进行转管。

霉菌污染的排除方法

霉菌的污染一般是由于操作不当引发的。以下是排除霉菌污染的有效方法。

1. 覆盖抑菌法

当斜面或平板上发现霉菌菌落时，使用比霉菌菌落稍大的滤纸，浸泡0.5%多菌灵溶液后覆盖在霉菌上，抑制霉菌生长，同时灵芝菌丝会继续生长。待菌丝生长后，再挑取先端菌丝进行转管纯化。

2. 药物滤菌法

与前述的细菌污染排除方法相似，此法在木屑培养基中加入0.5%多菌灵，分装于无底试管，接入带有霉菌的分离物，在28℃的条件下遮光培养。由于多菌灵能有效抑制霉菌生长，对灵芝菌丝的影响较小，因此在灵芝菌丝生长至另一端时即可转管进行纯化。

总结

以上是关于灵芝菌种分离与提纯的详细介绍，希望对您有帮助。如果您有更好的补充或建议，欢迎在下方留言与我们分享。