灵芝作为一种珍贵的药用真菌,其子实体在适宜条件下可生长出菌丝,具有重要的经济价值。在采集灵芝菌种后,为了确保其良好的品质,分离优良个体显得尤为关键。近期,许多栽培灵芝的朋友询问,灵芝菌种分离前需要做哪些准备工作?以下内容为大家提供一些参考。
在进行灵芝菌种分离的过程中,必须在一个清洁无菌的环境中操作。这包括无菌室、无菌箱或洁净工作台的保持干净。每次使用前,可以用0.1%的升汞溶液或70%的乙醇彻底擦拭工作台。微生物通常附着在尘埃上或悬浮在空气中,因此可以使用喷雾或煮沸的水方法,使空气中的水汽达到饱和,从而去除悬浮的尘埃与微生物。在分离过程中,培养皿、刀剪、接种铲等所有器具以及工作人员的工作服必须进行严格的无菌处理。此外,在操作时避免在操作间内走动,以防引入杂菌。
无菌水是指经过高压灭菌的自来水。将适量的自来水倒入三角瓶中,塞上棉塞,随后进行高压灭菌。注意,装入的水量不宜过多,以免在高压灭菌时棉塞湿透。无菌水应尽量在短时间内使用,以避免污染。
在日常操作中,常用的消毒液包括0.1%升汞溶液、漂白粉和70%的酒精溶液。此外,还可以使用5%福尔马林、3%过氧化氢和2%高锰酸钾等作为表面消毒剂。处理时间和浓度因材料而异,消毒后务必用无菌水冲洗干净。
细菌污染是进行真菌分离时最大的敌人。有效抑制细菌生长的方法是向培养基中添加适量的抗生素。比如,添加金霉素(30微克/毫升)能够抑制大多数细菌,而青霉素(2微克/毫升)则主要抑制革兰氏阳性细菌。针对革兰氏阴性细菌,可以添加多黏菌素B(0.5微克/毫升)等。需要注意的是,除了氯霉素可以在制作培养基时直接加进外,其他抗生素应在培养基灭菌后冷却到约45℃时再加入。此外,适当调节培养基的pH值,通常酸性培养基对大部分细菌具备抑制作用,这样不会影响真菌的生长。
上述就是灵芝菌种分离前的准备工作。如果您有更好的建议或经验,欢迎在下方留言与我们分享。
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